超純水對HPLC的重要性

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一種有效可靠的技術(shù)，目前已成為許多實(shí)驗室研究的重要工具。HPLC最常見(jiàn)的一個(gè)問(wèn)題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。

首先我們來(lái)看一看常見(jiàn)污染物有哪些？

1、可見(jiàn)雜質(zhì)

可見(jiàn)雜質(zhì)可以損壞泵和注射器，也可以堵塞色譜柱并且熔化它，這會(huì )導致回壓增大。顆粒還會(huì )表現為另一種固相，可能改變樣品的組分。

2、有機物

超純水中的有機物可能影響色譜峰的分離度和積分、可能導致鬼峰、還可能改變固定相的選測性以及影響色譜基線(xiàn)。

3、離子

離子濃度的改變會(huì )影響分離結果，部分能吸收UV的離子會(huì )對峰產(chǎn)生影響。某些有腐蝕性離子的還會(huì )降低高壓輸液泵等配件的使用壽命。

4、膠體

膠體會(huì )不可逆的吸附在固定相上面，影響柱的分離效果。

5、微生物

微生物會(huì )堵塞色譜柱，其代謝產(chǎn)物會(huì )增加有機物，顆粒等污染物。

目前，部分HPLC分析中使用的純凈水和蒸餾水，由于純凈水和蒸餾水均只是普通純水而不是超純水，水中仍含有少量離子和有機物等雜質(zhì)，用以配制液相和洗脫液不僅可能污堵昂貴的色譜柱，也影響HPLC定出平坦的基線(xiàn)。

純凈水的純化工藝包括吸附、過(guò)濾、反滲透等，對顆粒性有機物有一定的去除效果，但對微量離子及有機物的去除卻不能滿(mǎn)足高靈敏度的HPLC，并且，如果保存不當，水質(zhì)下降更多，因此表現在HPLC色譜圖上，雖無(wú)特定吸收峰，但基線(xiàn)存在較嚴重的不穩干擾。

蒸餾水是指用蒸餾方法制備的純水?？煞忠淮魏投啻握麴s水。水經(jīng)過(guò)一次蒸餾，不揮發(fā)的組分殘留在容器中被除去，揮發(fā)的組分進(jìn)入蒸餾水的初始餾分中，通常只收集餾分的中間部分，約占60％，要得到更純的水，可在一次蒸餾水中加入堿性高錳酸鉀溶液，除去有機物和二氧化碳；加入非揮發(fā)性的酸（硫酸或磷酸），使氨成為不揮發(fā)的銨鹽。通過(guò)對雙蒸水進(jìn)行HPLC檢測時(shí)發(fā)現，254nm和214nm在22-27分鐘時(shí)都出現較強的吸收峰，這表明有疏水性較強的有機物污染，其原因應是蒸餾過(guò)程的共沸現象導致了某些揮發(fā)性有機物去除不徹底。

綜上，為了能滿(mǎn)足高了靈敏度的HPLC，達到較穩定準確的分析結果，建議HPLC分析中使用超純水。

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